Biochimica clinica

A.A. 2018/2019
Insegnamento per
6
Crediti massimi
56
Ore totali
SSD
BIO/12
Lingua
Italiano
Obiettivi formativi
Scopo del corso di Biochimica Clinica è quello di fornire agli studenti le basi teoriche e pratiche necessarie per poter scegliere le metodologie analitiche di laboratorio più appropriate per le analisi di biochimica clinica e biologia molecolare clinica veterinaria e per comprenderne ed interpretarne criticamente i risultati. Per ogni metodologia descritta, saranno riportati esempi di markers molecolari comunemente utilizzati per la diagnostica del laboratorio veterinario.

Obiettivi specifici
1) Conoscenze e capacità di comprensione: lo studente dovrà dimostrare conoscenze teoriche e pratiche dei metodi di analisi di chimica clinica, enzimatici, immunochimici, elettroforetici, cromatografici, elettrochimici, fotometria atomica, biologia molecolare. Dovrà dimostrare di aver compreso quali sono fattori che influenzano il dato di laboratorio, come controllare gli errori analitici ed effettuare il controllo di qualità.
2) Capacità di applicare conoscenze e comprensione: lo studente dovrà dimostrare di essere in grado di applicare le conoscenze acquisite per convertire un risultato strumentale in un parametro di diagnostica biochimica ed di interpretarlo ai fini diagnostici.
3) Autonomia di giudizio: lo studente dovrà essere in grado di affrontare in modo in modo critico e proattivo lo studio della materia, sia per quanto riguarda le informazioni presenti sul materiale fornito dal docente che su quelle riportate dai testi consigliati.
4) Abilità comunicative: lo studente dovrà esser in grado di esporre le nozioni acquisite con una terminologia appropriata durante le lezioni frontali, le esercitazioni pratiche e nelle domande a risposta aperta d'esame.

Struttura insegnamento e programma

Edizione attiva
Responsabile
BIO/12 - BIOCHIMICA CLINICA E BIOLOGIA MOLECOLARE CLINICA - CFU: 6
Esercitazioni: 16 ore
Lezioni: 40 ore
Turni:
Attività esercitative GRUPPO per tutti
Docente: Borromeo Vitaliano
Attività esercitative ripetute a gruppi di studenti
Docente: Borromeo Vitaliano
STUDENTI FREQUENTANTI
Programma
1. DIDATTICA FRONTALE
- Unità di misura in biochimica clinica. Unità SI e convenzionali nell'espressione delle concentrazioni (peso/volume, molarità, ppm e ppb, percentuale). (4h)
- Energia radiante. Assorbanza, trasmittanza, spettrofotometria, fluorimetria, luminometria, torbidimetria, nefelometria, rifrattometria, spettroscopia di riflettanza, assorbimento atomico. (3h)
- Dalla lettura strumentale alla concentrazione dell'analita. (3h)
- Metodi di chimica clinica. (2h)
- Metodi enzimatici per il dosaggio dei metaboliti di interesse biochimico clinico nei liquidi biologici. (2h)
- Metodi enzimatici per il dosaggio degli enzimi ed isoenzimi di interesse biochimico clinico nei liquidi biologici. (3h)
- Metodi immunochimici. Concetti di antigene, epitopo e di affinità tra anticorpo e antigene. (2h)
- Principi ed applicazioni di metodi per il dosaggio di anticorpi e antigeni: test diretti e test con reagenti marcati (ex. ELISA) competitivi e non competitivi. Descrizione dei componenti e funzionamento di kits lataral-flow. (3h)
- Metodi elettroforetici. Principi generali, elettroforesi a carica netta, SDS-elettroforesi, IEF, Western blotting. Interpretazione dell'elettroferogramma. (3h)
- Metodi cromatografici. Principi generali, gel cromatografia, cromatografia a scambio ionico, di affinità, a fase inversa. Interpretazione del cromatogramma. (2h)
- Metodi elettrochimici. Misure in potenziometria con elettrodi ionoselettivi e misure in amperometria. (1h)
- Fotometria atomica. Assorbimento ed emissione atomica. (1h)
- Tecniche di biologia molecolare. PCR, analisi dei prodotti di PCR, RFLP, sequenziamento. (3h)
- Fattori che influenzano il dato di laboratorio Variabilità pre-analitica. Variabilità analitica: precisione, accuratezza, sensibilità, limite di determinabilità, specificità, cross-reatività, specie-specificità. Obbietivi per gli errori analitici. Controllo di qualità interno ed esterno. (4h)
- Interpretazione dell'analisi di laboratorio ai fini diagnostici. Variabilità biologica. Valori ed intervalli di riferimento. Test patognomonico e non patognomonico. Concetti di sensibilità e specificità diagnostica, di prevalenza, calcolo dei valori predittivi negativi e predittivi positivi dei test diagnostici. (4h)

2. ESERCITAZIONI

- Esercizi di trasformazione tra grandezze e unità di misura utilizzate in biochimica clinica e calcoli per la preparazione di soluzioni a specifiche concentrazioni peso/volume, molarità, percentuale, ppm e ppb, soluzioni tampone, diluizioni. (10h, in aula).
- Applicazione di metodiche di laboratorio per la l'identificazione di biomolecole in campioni biologici. Dosaggio delle proteine totali in campioni di plasma bovino con metodo di Lowry. (2h, laboratorio di biochimica).
- Elaborazione matematica, rappresentazione grafica e analisi critica dei risultati di analisi di laboratorio. Costruzione e compilazione di fogli di calcolo Excel con dati numerici strumentali ottenuti da dosaggi delle proteine, ELISA sandwich e competitivi per risalire alla concentrazione dell'analita misurato. (4h, in aula informatica).
Informazioni sul programma
Il programma delle lezioni frontali si articola in una prima sezione generale, nella quale si affrontano tematiche comuni a tutte le analisi biochimico cliniche (strumentazione, trasformazione del dato strumentale in concentrazione, unità di misura per le concentrazioni). Una seconda parte specifica, nella quale si affrontano le diverse metodiche di laboratorio con le quali si analizzano nei campioni biologici di origine animale i più comuni analiti di interesse medico veterinario. Una sezione finale, dedicata all'interpretazione diagnostica del dato di laboratorio.

Le esercitazioni sono dedicate all'esecuzione di dosaggi e all'eleaborazione del risultato di comune utilizzo nei laboratori di analisi biochimico cliniche veterinarie.
Propedeuticità
Biochimica e Biologia Molecolare
Prerequisiti e modalità di esame
- Gli appelli sono in numero di 8 e si svolgono nei mesi di: gennaio, febbraio, aprile, giugno, luglio, settembre, ottobre, novembre/dicembre. Appelli aggiuntivi per gli studenti fuori corso saranno tenuti nei mesi di marzo e maggio.
- Per sostenere l'esame è indispensabile l'iscrizione all'appello mediante il servizio online SIFA dell'Ateneo (N.B.: le iscrizioni chiudono 4 giorni prima della data dell'esame) e devono essere stati superati gli esami propedeutici obbligatori.

- La prova d'esame consiste in una prova scritta e da un breve colloquio orale.

La prova scritta è costituita da tre sezioni: (1) dieci quesiti a scelta multipla e/o a risposta aperta univoca nei quali lo studente dovrà dimostrare conoscenza e capacità di comprensione dei principi teorici e aspetti pratici delle principali metodiche di analisi di biochimica e di biologia molecolare utilizzate nei laboratori di diagnostica veterinaria; (2) due domande a risposta aperta articolata nel quale lo studente deve dimostrare di possedere capacità di applicare le sue conoscenze nel convertire un risultato strumentale in un parametro di diagnostica biochimica; (3) cinque esercizi di calcolo riguardanti le trasformazioni tra unità di misura di concentrazione e la preparazione di soluzioni.

Il voto è espresso in trentesimi, all'assegnazione del quale le varie sezioni della prova concorrono nel modo seguente. Sezione 1 (10 punti): un punto per ogni quesito corretto, zero punti per ogni quesito errato. Sezione 2 (10 punti): cinque punti per una risposta accettabile, due punti per una risposta parzialmente accettabile, zero punti se la risposta non è accettabile. Sezione 3 (10 punti): due punti per ogni risposta corretta, un punto per ogni risposta parzialmente corretta, zero punti per ogni risposta errata.

Il colloquio orale è dedicato alla discussione critica del risultato dello scritto e all'accettazione del voto da parte dello studente.
Metodi didattici
Il Modulo, articolato in 6 CFU, comprende:
- Didattica frontale (5 CFU - 40 ore). Lezioni in aula nelle quali vengono discussi principi e applicazioni delle principali metodologie biochimiche e di bilogia molecoare clinica impiegate nel laboratorio di diagnostica biochimica veterinaria;
- Esercitazioni (1 CFU - 16 ore). Si tengono in aula per tutti gli studenti, in laboratorio didattico di biochimica per gruppi di 2 studenti ed in sala computer singolarmente. Sono finalizzate all'esecuzione di metodiche di misura di analiti di interesse biochimico clinico veterinario e all'elaborazione di risultati numerici strumentali per la conversione di un risultato strumentale in un parametro di diagnostica biochimica.
Materiale didattico e bibliografia
- Appunti dalle lezioni e materiale distribuito e pubblicato sul sito ARIEL di Ateneo [http://vborromeobcv.ariel.ctu.unimi.it].

Libri di testo:
- Biochimica clinica, 2° edizione (2000), Luigi Spandrio, Edizioni Sorbona. Prima Parte (Biochimica Clinica Generale)

Per approfondimenti:
- Metodologia biochimica - Keith Wilson e John Walker, 5° edizione - Eds Italiana Pilone e Pollegioni, Raffaello Cortina Editore (2006).
- Clinical biochemistry of domestic animals, 6° edizione (2008), Kaneko JJ, Academic press.
STUDENTI NON FREQUENTANTI
Programma
Non contemplato, il corso prevede la frequenza obbligatoria
Prerequisiti e modalità di esame
Non contemplato, il corso prevede la frequenza obbligatoria
Materiale didattico e bibliografia
Not included, attendance at the course is mandatory
Periodo
Secondo semestre
Modalità di valutazione
Esame
Giudizio di valutazione
voto verbalizzato in trentesimi
Docente/i
Ricevimento:
Tutti i giorni, su appuntamento
Milano e Lodi