Biotecnologie: modelli sperimentali nella ricerca

A.A. 2019/2020
Insegnamento per
12
Crediti massimi
102
Ore totali
SSD
AGR/18 AGR/20 VET/07
Lingua
Inglese
Obiettivi formativi
L'obiettivo del corso è quello di illustrare metodologie di base ed avanzate applicabili nell'ambito della ricerca al fine di fornire gli strumenti utili allo studente per sviluppare una capacità critica nell'individuazione e nella scelta dei modelli sperimentali in relazione alla loro applicabilità.

Struttura insegnamento e programma

Edizione attiva
Responsabile
Moduli o unità didattiche
Modulo: Alternative methods in Toxicology
VET/07 - FARMACOLOGIA E TOSSICOLOGIA VETERINARIA - CFU: 4
Esercitazioni: 12 ore
Lezioni: 18 ore

Modulo: Cell culture
AGR/18 - NUTRIZIONE E ALIMENTAZIONE ANIMALE - CFU: 5
Esercitazioni: 36 ore
Lezioni: 12 ore
Docente: Cheli Federica

Modulo: Wellbeing and care of laboratory animals
AGR/20 - ZOOCOLTURE - CFU: 3
Esercitazioni: 12 ore
Lezioni: 12 ore
Docente: Luzi Fabio

STUDENTI FREQUENTANTI
Informazioni sul programma
La ricerca nel campo delle biotecnologie si orienta sempre di più verso la multidisciplinarietà attraverso approcci integrati che utilizzano diversi modelli sperimentali. In tal senso il corso è articolato in 3 moduli: Colture cellulari, Metodi alternativi in Tossicologia e Benessere dell'animale da laboratorio ed "Animal care".
Prerequisiti e modalità di esame
Esame scritto
Metodi didattici
lezioni frontali ed esercitative
Modulo: Cell culture
Programma
Gli obiettivi del modulo sono quelli di fornire conoscenze di base ed avanzate della tecnologia delle celle cultura.
Didattica frontale
Progettazione e attrezzature per un laboratorio di colture cellulari
Colture Cellulari - principi fondamentali
- Principali tipi di colture cellulari: colture primarie e linee cellulari
- L'ambiente cellulare: ambiente sterile, pH, temperatura, soluzioni e terreni di coltura
- Tecniche di base per l'allestimento di colture cellulari: coltura in sospensione, in monostrato
- Tecniche avanzate per l'allestimento di colture cellulari: inserti, mammosfere, culture 3D
- Controllo qualità
- Protocolli per la quantificazione e la vitalità delle cellule

Forum e Journal Club

Esercitazioni
The "Do's and Don'ts": tecnica asettica e di buone prassi di coltura cellulare
Preparazione e conservazione di soluzioni e terreni di coltura
Crioconservazione e stoccaggio delle cellule
Saggi di citotossicità e di vitalità
mantenimento di linee cellulari in coltura
valutazione di protocolli per la ricerca: differenziamento e rimodellamento tissutale, nutrigenomica, valutazione delle proprietà funzionali degli alimenti e dei claims nutrizionali e sulla salute
Visita a Laboratori e Banche Cellule
Metodi didattici
Lezioni frontali ed esercitative.
Journal club
Materiale didattico e bibliografia
Il materiale didattico verrà fornito durante il corso (dispense e presentazioni in .pdf)
Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique. R. Ian Freshney, Wiley-Liss, 2000.
Animal Cell Culture: A Practical Approach. John R. W. Masters, Oxford University Press, 2000.
Animal Cell Culture and Technology. Mike Butler, Michael Butler, Taylor & Francis, Inc., 2004.
Introduzione alle colture cellulari, Mariotti GL et al., Tecniche Nuove, 2010
Modulo: Alternative methods in Toxicology
Programma
Lectures
Toxicology, Alternative Methods and 3Rs Replace, Refine, Reduce (2 hours)
Alternative Methods and Validation (2 hours)
Replacement: validated in vitro test (4 hours)
Integrating Testing Strategy (2 hours)
Skin sensitization LLNA (2 hours)
Carcinogenesis (2 hours)
Reproductive Toxicology and Alternative methods (2 hours)
Botulin Toxin and 3Rs (2 hours)

Practical
In vitro markers in toxicity testing (4 hours)
In silico methods (4 hours)
ITS, Integrating Testing Strategy examples (2 hours)
Bioreactors (2 hours)
Metodi didattici
lezioni frontali ed esercitative
Materiale didattico e bibliografia
Modulo: Wellbeing and care of laboratory animals
Programma
Teoria
Gestione e allevamento delle colonie transgeniche di Roditori (2 ore)
Gestione e allevamento dello Zebrafish (Danio rerio) (2 ore)
Anestesia, analgesia ed eutanasia: Decreto Legislativo del 4 marzo 2014 n. 26 (2 ore)
Dosaggi e campionamenti (2 ore)
Il protocollo sperimentale nella ricerca biomedica (2 ore)
Le adozioni (1 ora)
I Nematodi nella ricerca (1 ora)


Esercitazioni

Tecniche di imaging non invasivo: la Termografia (2 ore)
Modelli murini (3 ore)
Visita a struttura di ricerca (4 ore)
Visite ad allevamenti di animali da laboratorio (3 ore)
Metodi didattici
lezioni frontali ed esercitative
Materiale didattico e bibliografia
Bibliografia

- Decreto Legislativo 4 marzo 2014 n° 26
Attuazione della direttiva 2010/63/UE sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici.
(GU Serie Generale n.61 del 14-3-2014)
- Pain Management in Animals, 1e
by Paul Flecknell and Avril Waterman-Pearson
SAUNDERS, 2000.
- Handbook of Laboratory Animal Management and Welfare
by Sarah Wolfenson and Maggie Lloyd
WILEY-BLACKWEL, 2013.
- CD con le presentazioni Power Point del corso.
STUDENTI NON FREQUENTANTI
Prerequisiti e modalità di esame
Esame scritto
Modulo: Cell culture
Programma
Gli obiettivi del modulo sono quelli di fornire conoscenze di base ed avanzate della tecnologia delle celle cultura.
Didattica frontale
Progettazione e attrezzature per un laboratorio di colture cellulari
Colture Cellulari - principi fondamentali
- Principali tipi di colture cellulari: colture primarie e linee cellulari
- L'ambiente cellulare: ambiente sterile, pH, temperatura, soluzioni e terreni di coltura
- Tecniche di base per l'allestimento di colture cellulari: coltura in sospensione, in monostrato
- Tecniche avanzate per l'allestimento di colture cellulari: inserti, mammosfere, culture 3D
- Controllo qualità
- Protocolli per la quantificazione e la vitalità delle cellule

Forum e Journal Club

Esercitazioni
The "Do's and Don'ts": tecnica asettica e di buone prassi di coltura cellulare
Preparazione e conservazione di soluzioni e terreni di coltura
Crioconservazione e stoccaggio delle cellule
Saggi di citotossicità e di vitalità
mantenimento di linee cellulari in coltura
valutazione di protocolli per la ricerca: differenziamento e rimodellamento tissutale, nutrigenomica, valutazione delle proprietà funzionali degli alimenti e dei claims nutrizionali e sulla salute
Visita a Laboratori e Banche Cellule
Materiale didattico e bibliografia
Il materiale didattico verrà fornito durante il corso (dispense e presentazioni in .pdf)
Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique. R. Ian Freshney, Wiley-Liss, 2000.
Animal Cell Culture: A Practical Approach. John R. W. Masters, Oxford University Press, 2000.
Animal Cell Culture and Technology. Mike Butler, Michael Butler, Taylor & Francis, Inc., 2004.
Introduzione alle colture cellulari, Mariotti GL et al., Tecniche Nuove, 2010
Modulo: Alternative methods in Toxicology
Programma
Lectures
Toxicology, Alternative Methods and 3Rs Replace, Refine, Reduce (2 hours)
Alternative Methods and Validation (2 hours)
Replacement: validated in vitro test (4 hours)
Integrating Testing Strategy (2 hours)
Skin sensitization LLNA (2 hours)
Carcinogenesis (2 hours)
Reproductive Toxicology and Alternative methods (2 hours)
Botulin Toxin and 3Rs (2 hours)

Practical
In vitro markers in toxicity testing (4 hours)
In silico methods (4 hours)
ITS, Integrating Testing Strategy examples (2 hours)
Bioreactors (2 hours)
Materiale didattico e bibliografia
Modulo: Wellbeing and care of laboratory animals
Programma
Teoria
Gestione e allevamento delle colonie transgeniche di Roditori (2 ore)
Gestione e allevamento dello Zebrafish (Danio rerio) (2 ore)
Anestesia, analgesia ed eutanasia: Decreto Legislativo del 4 marzo 2014 n. 26 (2 ore)
Dosaggi e campionamenti (2 ore)
Il protocollo sperimentale nella ricerca biomedica (2 ore)
Le adozioni (1 ora)
I Nematodi nella ricerca (1 ora)


Esercitazioni

Tecniche di imaging non invasivo: la Termografia (2 ore)
Modelli murini (3 ore)
Visita a struttura di ricerca (4 ore)
Visite ad allevamenti di animali da laboratorio (3 ore)
Materiale didattico e bibliografia
Bibliografia

- Decreto Legislativo 4 marzo 2014 n° 26
Attuazione della direttiva 2010/63/UE sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici.
(GU Serie Generale n.61 del 14-3-2014)
- Pain Management in Animals, 1e
by Paul Flecknell and Avril Waterman-Pearson
SAUNDERS, 2000.
- Handbook of Laboratory Animal Management and Welfare
by Sarah Wolfenson and Maggie Lloyd
WILEY-BLACKWEL, 2013.
- CD con le presentazioni Power Point del corso.
Periodo
Secondo semestre
Periodo
Secondo semestre
Modalità di valutazione
Esame
Giudizio di valutazione
voto verbalizzato in trentesimi
Docente/i
Ricevimento:
Previo appuntamento
Via Celoria 10
Ricevimento:
previo appuntamento
Sede di Via Trentacoste, 2
Ricevimento:
su appuntamento telefonando al 0250318053 o scrivendo a: fabio.luzi@unimi.it
Studio del Docente - Dipartimento DIMEVET - Via Celoria, 10 Milano