Tecniche biochimiche per il laboratorio di analisi
A.A. 2023/2024
Obiettivi formativi
Fornire le conoscenze teorico-pratiche di tecniche laboratoristiche di base per analisi biochimiche finalizzate all'analisi qualitativa e quantitativa di campioni biologici/alimenti/materiali mediante spettrofluorimetria/colorimetria; fornire conoscenze dei fondamenti e delle principali applicazioni di tecniche biochimiche analitiche e preparative basate su elettroforesi e cromatografia
Risultati apprendimento attesi
Conoscenze e comprensione: principi teorico/pratici di tecniche biochimiche di base finalizzate all'analisi qualitativa e quantitativa di campioni biologici/alimenti/materiali mediante spettrofluorimetria/colorimetria e di tecniche analitiche e preparative basate su elettroforesi e cromatografia
Capacità applicative acquisite: preparazione ed esecuzione di semplici saggi basati su colorimetria/fluorescenza
Abilità comunicative e autonomia di giudizio: preparazione di semplici relazioni per la comunicazione dei risultati ottenuti nei saggi eseguiti in laboratorio/ valutazione della loro affidabilità
Capacità applicative acquisite: preparazione ed esecuzione di semplici saggi basati su colorimetria/fluorescenza
Abilità comunicative e autonomia di giudizio: preparazione di semplici relazioni per la comunicazione dei risultati ottenuti nei saggi eseguiti in laboratorio/ valutazione della loro affidabilità
Periodo: Primo semestre
Modalità di valutazione: Esame
Giudizio di valutazione: voto verbalizzato in trentesimi
Corso singolo
Questo insegnamento può essere seguito come corso singolo.
Programma e organizzazione didattica
Edizione unica
Responsabile
Periodo
Primo semestre
Programma
Didattica frontale
Procedure di sicurezza da rispettare in un laboratorio biochimica (0,5 h)
Descrizione dei principali solventi utilizzati in laboratori biochimici (0,5 h)
Richiami di chimica generale relativi ad unità di misura della quantità e della concentrazione di specie in soluzione (1 h)
Soluzioni tampone utilizzati in laboratorio; sistemi tampone negli organismi viventi (2 h)
Principi di spettrofotometria; utilizzo della spettrofotometria UV-visibile per il dosaggio di molecole da matrici biologiche ed alimenti, inclusi gli enzimi (5 h)
Principi di fluorimetria (1 h)
Principi di elettroforesi applicati alla analisi delle proteine (3 h)
Tecniche cromatografiche: principi ed applicazioni per la preparazione e l'analisi di composti (3 h)
Didattica esercitativa
Titolazione acido/base e preparazione di soluzioni tampone (4 h)
Spttrofotometria UV-visibile e colorimetria: determinazione dello spettro di assorbimento UV-vis di un composto, dosaggio di molecole mediante colorimetria, allestimento ed esecuzione di un esperimento per il dosaggio del contenuto proteico di un campione utilizzando retta di calibrazione, dosaggio di enzimi (5 ore)
Elettroforesi di proteine su gel di poliacrilammide in presenza di sodio dodecilsolfato (4 h)
Preparazione di una colonna cromatografica e suo utilizzo per lapurificazione di composti mediante gel filtrazione (3 h)
Procedure di sicurezza da rispettare in un laboratorio biochimica (0,5 h)
Descrizione dei principali solventi utilizzati in laboratori biochimici (0,5 h)
Richiami di chimica generale relativi ad unità di misura della quantità e della concentrazione di specie in soluzione (1 h)
Soluzioni tampone utilizzati in laboratorio; sistemi tampone negli organismi viventi (2 h)
Principi di spettrofotometria; utilizzo della spettrofotometria UV-visibile per il dosaggio di molecole da matrici biologiche ed alimenti, inclusi gli enzimi (5 h)
Principi di fluorimetria (1 h)
Principi di elettroforesi applicati alla analisi delle proteine (3 h)
Tecniche cromatografiche: principi ed applicazioni per la preparazione e l'analisi di composti (3 h)
Didattica esercitativa
Titolazione acido/base e preparazione di soluzioni tampone (4 h)
Spttrofotometria UV-visibile e colorimetria: determinazione dello spettro di assorbimento UV-vis di un composto, dosaggio di molecole mediante colorimetria, allestimento ed esecuzione di un esperimento per il dosaggio del contenuto proteico di un campione utilizzando retta di calibrazione, dosaggio di enzimi (5 ore)
Elettroforesi di proteine su gel di poliacrilammide in presenza di sodio dodecilsolfato (4 h)
Preparazione di una colonna cromatografica e suo utilizzo per lapurificazione di composti mediante gel filtrazione (3 h)
Prerequisiti
Conoscenze di chimica generale forniti da corsi di Chimica frequentati in precedenza relativi a definizioni di pH, sistemi tampone, concentrazione, nomenclatura dei principali composti inorganici ed organici utli ai fini della preparazione di tamponi acquosi; concetti acquisiti in corsi di Biochimica frequentati in precedenza relativi ad enzimi, substrati, inibitori e relativa rilevanza biologica
Metodi didattici
Lezioni frontali su aspetti teorici delle metodologie oggetto delle successive esercitazioni pratiche
Esercitazioni pratiche svolte in parte nei laboratori didattici ed in parte nei laboratori di ricerca del gruppo biochimico
Esercitazioni pratiche svolte in parte nei laboratori didattici ed in parte nei laboratori di ricerca del gruppo biochimico
Materiale di riferimento
l materiale di riferimento sarà fornito dal docente attraverso la nuova piattaforma MyARIEL di prossima introduzione. Il relativo link sarà pertanto comunicato direttamente agli studenti
Modalità di verifica dell’apprendimento e criteri di valutazione
Esame scritto della durata complessiva di 1,5 ore consistente in 1 domanda aperta sugli argomenti oggetto del corso ed un grafico e/o esercizio numerico per il calcolo di parametri misurabili sperimentalmente a partire da dati forniti dal docente. Il voto complessivo finale verrà calcolato quale media dei voti ottenuti nelle due parti dell'esame. In particolare terrà conto della completezza, chiarezza e correttezza dei contenuti per la risposta alla domanda aperta e della correttezza del risultato numerico ottenuto e della chiarezza e completezza degli elementi del grafico eventualmente richiesto a copletamento della seconda risposta.
Docente/i
Ricevimento:
Appuntamento tramite e-mail